ELISA试剂盒六大技术原理 ELISA试剂盒优点:
发布时间:2022/6/15 13:36:31 阅读人数:297
ELISA试剂盒六大技术原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被白细胞介素1β(IL-1β)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素1β(IL-1β)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
ELISA试剂盒优点:
1、准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900
2、灵敏度:zui低检测浓度小于(参考说明书)
3、特异性:不与其它可溶性ELISA试剂盒结构类似物交叉反应
4、重复性:板内、板间变异系数均小于15%
5、贮藏:2-8℃,避光防潮保存
6、有效期:6个月
ELISA试剂盒技术原理:
1、抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。
2、结合在固相载体表面ELISA试剂盒的抗原或抗体仍保持其免疫学活性。
3、酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。
4、受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。
5、此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
6、加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。测定方法具有ELISA试剂盒很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重复性好。以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。
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